近年來免疫療法在腫瘤治療上取得了一系列突破性成就，隨著美國FDA在2017年批準(zhǔn)了兩款CAR－T藥物，腫瘤免疫療法已成當(dāng)下熱門領(lǐng)域。業(yè)界認(rèn)為，憑借著效果好、毒副作用小的優(yōu)勢，免疫療法有望成為腫瘤治療終極武器。

進(jìn)行腫瘤免疫治療必然離不開對腫瘤微環(huán)境（TME）的研究。

腫瘤微環(huán)境是指腫瘤細(xì)胞的產(chǎn)生和生活的內(nèi)環(huán)境，由多種細(xì)胞類型和生物分子組成，它與腫瘤的發(fā)生、生長及轉(zhuǎn)移有著密切關(guān)系，它不僅包括腫瘤所在組織的結(jié)構(gòu)、功能和代謝，而且亦與腫瘤細(xì)胞自身的內(nèi)在環(huán)境（核和胞質(zhì)）有關(guān)。傳統(tǒng)的腫瘤治療方式聚焦在腫瘤細(xì)胞本身，隨著對腫瘤機(jī)制認(rèn)識的加深，對于腫瘤治療的關(guān)注點(diǎn)從腫瘤自身轉(zhuǎn)移到腫瘤和周圍組織的互動關(guān)系上。

上海市實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)研究院院長、上海市臨床檢驗(yàn)中心／質(zhì)量控制中心主任王華梁向動脈網(wǎng)表示：“腫瘤微環(huán)境研究是近年的前沿領(lǐng)域之一，為腫瘤診治提供了新的希望。越來越多的研究表明，腫瘤微環(huán)境視角下免疫和腫瘤相關(guān)分子的表達(dá)模式和功能，對于選擇最有可能受益于免疫治療的患者群體至關(guān)重要。通過對腫瘤免疫微環(huán)境進(jìn)行分型，可以更好地指導(dǎo)臨床治療，實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)醫(yī)療。”

然而，目前我們對腫瘤微環(huán)境還知之甚少，絕大部分的研究還無法模擬腫瘤組織免疫抑制的微環(huán)境。臨床迫切需要更有效的技術(shù)和手段，更好地研究腫瘤免疫微環(huán)境，解析腫瘤組織中的免疫細(xì)胞構(gòu)成。

針對這一需求，闊然基因基于多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)，給出了一套高效、精準(zhǔn)的腫瘤免疫微環(huán)境全景分析解決方案。

多重?zé)晒饷庖呓M化將是腫瘤微環(huán)境分析主流技術(shù)

闊然基因是國內(nèi)腫瘤免疫微環(huán)境分析賽道的早期布局者。闊然基因董事長卜令斌表示：“我們很早就開始關(guān)注腫瘤微環(huán)境，認(rèn)為腫瘤診療不僅要看腫瘤本身的生物學(xué)特征，還要關(guān)注腫瘤細(xì)胞和周圍環(huán)境的互動。”

“腫瘤組織與周圍組織一起構(gòu)成了腫瘤微環(huán)境，后者為腫瘤的生長、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移提供土壤。這就意味著，腫瘤檢測不應(yīng)只從基因?qū)用�，還要分析腫瘤微環(huán)境情況，才能有效預(yù)測腫瘤預(yù)后，評估治療反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)治療。”

遺憾的是，長久以來臨床一直缺乏成熟的腫瘤微環(huán)境分析技術(shù)。免疫組化技術(shù)、流式細(xì)胞術(shù)等傳統(tǒng)技術(shù)均存在一定程度的缺陷。

蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院病理科主任、江蘇省醫(yī)學(xué)會病理學(xué)分會主任委員郭凌川談道：“免疫組化對于腫瘤組織學(xué)病理的診斷起著非常重要的作用，只有通過對腫瘤組織進(jìn)行免疫組化分析才能最終對腫瘤進(jìn)行定性和分級。但盡管當(dāng)前免疫組化應(yīng)用廣泛，仍存在一些難以回避的劣勢，例如在一張切片上最多只能染1－2個(gè)指標(biāo)，難以完整刻畫高度異質(zhì)性腫瘤的真實(shí)特性。以及免疫組化雖然可以通過連續(xù)切片進(jìn)行多指標(biāo)的染色，但無法準(zhǔn)確分析蛋白之間的相關(guān)性。最為重要的是，其結(jié)果判讀主要通過人為定性和半定量，存在一定的主觀性�！�

而流式細(xì)胞術(shù)用于腫瘤微環(huán)境分析則存在丟失細(xì)胞的形態(tài)信息，無法判讀檢測組分的原位空間關(guān)系，新鮮樣品可及性差等問題。

郭凌川教授肯定了多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)在腫瘤微環(huán)境分析中的獨(dú)特優(yōu)勢。多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)基于TSA染色原理，能夠突破抗體種屬限制，在一張組織切片上對7－9個(gè)生物標(biāo)志物進(jìn)行免疫熒光染色，定量評估細(xì)胞的表型和活性，全景刻畫腫瘤免疫微環(huán)境以及細(xì)胞間的原位空間信息。

王華梁教授也對多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)的應(yīng)用潛力表示期待�！岸嘀�?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)能夠獲得關(guān)于細(xì)胞組成和空間排列的多通道信息，對腫瘤微環(huán)境進(jìn)行高維分析。已有研究結(jié)果表明基于腫瘤微環(huán)境的評估可能優(yōu)于已有的生物標(biāo)志物，基于多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)的腫瘤微環(huán)境檢測，能讓我們更深入地了解腫瘤的發(fā)生機(jī)制，更有可能預(yù)測腫瘤對治療的反應(yīng)�！�

由于熒光信號強(qiáng)度高且穩(wěn)定不易淬滅，多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)可將檢測靈敏度提高1000倍，且能夠檢測低豐度樣品，實(shí)現(xiàn)對患者腫瘤免疫分型全面、客觀地分析，精準(zhǔn)篩查免疫治療獲益人群。

卜令斌提到，除多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)外，空間轉(zhuǎn)錄組、空間成像、質(zhì)譜成像等新興技術(shù)在腫瘤免疫微環(huán)境分析中的應(yīng)用潛力也備受關(guān)注。 “但此類技術(shù)尚處于早期起步階段，技術(shù)不成熟，成本高。而多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)已經(jīng)較為成熟，相關(guān)科研成果豐富，已發(fā)展至大規(guī)模臨床應(yīng)用階段。相信在未來相當(dāng)長的一段時(shí)間內(nèi)，多重?zé)晒饷庖呓M化將是腫瘤免疫微環(huán)境分析的主流技術(shù)�！�

郭凌川教授也表示：“我們堅(jiān)信以多重?zé)晒饷庖呓M化為代表的新一代病理技術(shù)能大大助力腫瘤病理診斷的發(fā)展與變革�！�

整合上下游，打造腫瘤免疫微環(huán)境全景分析解決方案

早在2019年，闊然基因就開始在腫瘤免疫微環(huán)境分析行業(yè)上下游進(jìn)行布局，整合了多標(biāo)記染色、多光譜成像系統(tǒng)、圖像分析系統(tǒng)等產(chǎn)品和技術(shù)，推出了腫瘤免疫微環(huán)境全景分析解決方案。

據(jù)了解，闊然基因的腫瘤免疫微環(huán)境全景分析解決方案，利用多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)，基于Akoya公司最新的Vectra多光譜定量病理分析平臺，全景剖析腫瘤免疫微環(huán)境中的殺傷性T細(xì)胞、耗竭性T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞、細(xì)胞因子和免疫檢查點(diǎn)受體的浸潤情況，全面評估患者的預(yù)后和接受免疫抑制劑治療的療效，挖掘腫瘤免疫微環(huán)境與腫瘤發(fā)生發(fā)展、復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移和耐藥機(jī)制的關(guān)系和臨床分子機(jī)理。

臨床試驗(yàn)表明，在評估PD－L1蛋白表達(dá)水平方面，闊然基因的腫瘤免疫微環(huán)境全景分析解決方案與PDL1 （22C3，28－8 SP142，SP263 ） IHC“金標(biāo)準(zhǔn)”具有較好的一致性，并能從腫瘤免疫微環(huán)角度輔助醫(yī)生制定更精準(zhǔn)的用藥指導(dǎo)和治療方案。此外，臨床試驗(yàn)也表明，10％的腸癌患者表現(xiàn)出雙陽性耗竭性T細(xì)胞的浸潤，背后的臨床分子機(jī)理有待進(jìn)一步驗(yàn)證。

目前，闊然基因已經(jīng)在上海實(shí)驗(yàn)室布局了整套多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)平臺，包括病理診斷、多重染色標(biāo)記、多光譜成像系統(tǒng)和圖像分析系統(tǒng)，針對免疫檢查點(diǎn)抑制劑的預(yù)測開發(fā)出了6款檢測產(chǎn)品，其中與已批準(zhǔn)的伴隨診斷產(chǎn)品PD－L1表達(dá)相比，驗(yàn)證結(jié)果顯示有較高的一致性。

此外，闊然基因已經(jīng)發(fā)起了全國千例腫瘤免疫微環(huán)境的隊(duì)列研究，以進(jìn)一步驗(yàn)證產(chǎn)品的臨床有效性，預(yù)計(jì)研究成果將在2022年年中公布。

多重?zé)晒饷庖呓M化有望成為病理科新增長點(diǎn)

卜令斌認(rèn)為，多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)經(jīng)過近5年的發(fā)展，前期的基礎(chǔ)研究已經(jīng)證實(shí)這項(xiàng)技術(shù)在病理診斷、判斷預(yù)后、免疫療效預(yù)測方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢。例如，2019年《JAMA Oncol》發(fā)表的一項(xiàng)研究顯示，針對8000例患者，用不同生物標(biāo)記物PD－L1、腫瘤突變負(fù)荷（TMB）、基因表達(dá)譜（GEP）和腫瘤微環(huán)境來預(yù)測免疫檢查點(diǎn)抑制劑的療效，結(jié)果顯示利用多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)的腫瘤免疫微環(huán)境分析有最高的預(yù)測價(jià)值，甚至比前三者聯(lián)合的預(yù)測效果還要好。

“現(xiàn)在，多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)正處于從科研向應(yīng)用轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵階段，闊然基因的最終目標(biāo)就是加速推動該技術(shù)在臨床實(shí)現(xiàn)大規(guī)模應(yīng)用。我們相信多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)能夠成為繼高通量測序（NGS）之后，病理科下一個(gè)增長點(diǎn)�！辈妨畋蟊硎�。

“但我們非常清楚，想要推動多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)快速實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化、規(guī)�；�，不能依靠闊然基因一家的力量�！�

因此，闊然基因選擇了開放平臺的戰(zhàn)略，將多重?zé)晒饷庖呒夹g(shù)平臺開放給第三方醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室、科研機(jī)構(gòu)、藥廠等合作伙伴，形成合作聯(lián)盟，共同探索多重?zé)晒饷庖呒夹g(shù)在藥物療效預(yù)測、腫瘤復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)評估、藥物研發(fā)等場景的應(yīng)用，打造技術(shù)－應(yīng)用生態(tài)圈，形成行業(yè)共識，推動多重?zé)晒饷庖呒夹g(shù)在臨床落地。

作者：焦艷麗