為評(píng)價(jià)疫苗的免疫原性，研究者在第0天和第7天分別給小鼠接種不同劑量的候選疫苗后，未觀察到炎癥或其他不良反應(yīng)，新冠病毒的S蛋白和RBD特異性的免疫球蛋白在免疫后小鼠的血清中迅速產(chǎn)生，并于第6周達(dá)到滴度峰值。RBD特異的免疫球蛋白在S蛋白誘導(dǎo)產(chǎn)生的抗體中占一半，提示RBD是主要的免疫原，這也與恢復(fù)期患者的血清學(xué)特征非常相似。與恢復(fù)期患者血清相比，該疫苗誘導(dǎo)出了更高滴度的S蛋白特異性抗體。

接下來(lái)，研究者使用微量中和試驗(yàn)測(cè)定新冠病毒特異性中和抗體在一段時(shí)間內(nèi)的水平。結(jié)果顯示，高劑量免疫的中和抗體在初免后第1周出現(xiàn)，在第2周加強(qiáng)免疫后顯著增加，在第7周達(dá)到峰值，而對(duì)照組則未檢測(cè)到新冠病毒特異性抗體反應(yīng)。研究者在大鼠中以及對(duì)不同毒株的實(shí)驗(yàn)中也得到了相似的結(jié)果。

隨后研究者在疫苗免疫后的恒河猴中進(jìn)行了攻毒實(shí)驗(yàn)以評(píng)價(jià)疫苗免疫原性和保護(hù)效果。研究者在第0、7和14天給恒河猴接種不同劑量（3微克和6微克）的疫苗，結(jié)果顯示，S蛋白特異性的免疫球蛋白和中和抗體均在第2周被誘導(dǎo)出來(lái)，并在第3周繼續(xù)增加，抗體滴度與恢復(fù)期的新冠患者的血清中的抗體滴度相似。

之后，研究者在第22天進(jìn)行攻毒。結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，疫苗免疫后的恒河猴肺部組織病理變化顯著減小，病毒載量也顯著下降。高劑量組的4只恒河猴感染后的第7天，咽喉、肛門和肺部都未檢測(cè)到病毒，也沒(méi)有觀察到抗體依賴的增強(qiáng)現(xiàn)象。中劑量組感染后第7天咽部、肛門和肺部標(biāo)本中能部分檢測(cè)到病毒，但與對(duì)照組相比病毒載量降低了約95％。結(jié)果表明，接種6微克劑量候選疫苗后可以對(duì)新冠病毒攻毒提供完全的保護(hù)，3微克劑量的疫苗有部分保護(hù)作用。

研究者又通過(guò)觀測(cè)臨床指標(biāo)和生化指數(shù)來(lái)驗(yàn)證該疫苗的安全性。他們發(fā)現(xiàn)，所有接種疫苗的恒河猴均未發(fā)現(xiàn)發(fā)燒和體重減輕現(xiàn)象，且食欲和精神狀態(tài)都保持正常。在血液和生化分析方面，接種了疫苗的恒河猴的淋巴細(xì)胞亞群比例（CD3＋、CD4＋和CD8＋）以及關(guān)鍵細(xì)胞因子（TNF－＆alpha；、IFN－＆gamma；、IL－2、IL－4、IL－5和IL－6）與對(duì)照組相比均沒(méi)有顯著變化。此外，第29天對(duì)接種疫苗恒河猴的肺、心、脾、肝、腎和腦在內(nèi)的各種器官組織的病理學(xué)評(píng)估表明，該疫苗也沒(méi)有引起顯著的病理學(xué)特征，以上結(jié)果表明候選疫苗在恒河猴中具有安全性。

值得一提的是，因?yàn)楹愫雍锓浅＝咏�人類，且該研究采用了多種毒株，研究本身具有廣泛的參考意義。

該研究由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所秦川團(tuán)隊(duì)領(lǐng)銜，聯(lián)合浙江省疾控中心張嚴(yán)峻團(tuán)隊(duì)、科興控股生物技術(shù)有限公司、中國(guó)科學(xué)院生物物理研究所王祥喜團(tuán)隊(duì)、中國(guó)食品藥品檢定研究院、中國(guó)疾病預(yù)防控制中心傳染病預(yù)防控制所等多家單位合作完成。

進(jìn)入臨床試驗(yàn)的新冠疫苗

目前，全球新冠疫苗的研發(fā)推進(jìn)速度都很快。

如上文提到，現(xiàn)如今已經(jīng)有180多種疫苗進(jìn)入了臨床試驗(yàn)。其中據(jù)張文宏介紹，美國(guó)有2個(gè)疫苗進(jìn)入三期臨床試驗(yàn)，我國(guó)有2個(gè)疫苗進(jìn)入二期臨床試驗(yàn)。

基于上述研究成果正在進(jìn)行臨床試驗(yàn)的疫苗“克爾來(lái)�！笔俏覈�(guó)研制的一種滅活疫苗，它用新型冠狀病毒（CZ株）接種Vero細(xì)胞，經(jīng)病毒培養(yǎng)、收獲、滅活、純化和鋁吸附制成，其主要成分為滅活的新型冠狀病毒（SARS－CoV－2），不添加防腐劑和生物保護(hù)劑。

圖 ｜ 新冠病毒滅活疫苗的特征描述

1月28日科興中維正式啟動(dòng)了該疫苗研制項(xiàng)目；3月13日，科興中維先后向國(guó)家藥監(jiān)局藥品審評(píng)中心（CDE）滾動(dòng)提交了18輪申報(bào)資料，并于4月12日向CDE正式提出臨床試驗(yàn)申請(qǐng)；4月16日，它的臨床一期試驗(yàn)正式在江蘇省徐州市睢寧縣啟動(dòng)，共招募144名18至59歲的健康志愿者，分為隨機(jī)、雙盲、安慰劑對(duì)照（不含病毒成分的對(duì)照疫苗）組三個(gè)組別。

當(dāng)然，不僅如此，我國(guó)還有其他兩種滅活病毒也同樣進(jìn)入了臨床試驗(yàn)，國(guó)外進(jìn)入臨床試驗(yàn)的疫苗還包括英國(guó)牛津大學(xué)研發(fā)的腺病毒載體疫苗、美國(guó)生物科技公司Moderna研發(fā)的mRNA疫苗mRNA－1273、德國(guó)生物科技公司BioNTech研發(fā)的mRNA疫苗BNT162以及美國(guó)Inovio Pharmaceuticals研發(fā)的新冠DNA疫苗INO－4800等。