根據(jù)細(xì)胞外囊泡（EVs）的生物合成或釋放途徑，可以對(duì)囊泡進(jìn)行分類：外泌體（exosomes）、微粒／微囊泡（microparticles／microvesicles）、凋亡小體（apoptotic body／bleb）、腫瘤小泡（large oncosomes），以及其他各種EV亞群。外囊泡膜可抵抗胞外環(huán)境核酸酶的降解作用，因此可作為小分子核酸藥物載體，這方面的應(yīng)用已有大量文獻(xiàn)報(bào)道。

幾種外囊泡對(duì)比

目前，產(chǎn)業(yè)界用以載體開發(fā)的外囊泡（EVs）主要有三種：人源工程化外泌體、人類間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）來(lái)源的外泌體和紅細(xì)胞／血小板等無(wú)核細(xì)胞來(lái)源的外泌體。工程化外泌體因?yàn)榭梢孕揎椘浒邢虿⑶姨嵘�藥物裝載效率，目前是產(chǎn)業(yè)界的主流。MSCs來(lái)源的外泌體大約40－80nm大小，可以遞送20－30 bp微小RNA，紅細(xì)胞來(lái)源的外泌體由于受到紅細(xì)胞本身特質(zhì)的影響最長(zhǎng)可以攜帶30 kb的DNA。

2偶聯(lián)靶向遞送：自由搭配靶頭，高壁壘“生物導(dǎo)彈”

與載體遞送方式不同的是，偶聯(lián)靶向技術(shù)是用一個(gè)Linker（連接子）將藥物和具備靶向遞送功能的分子相連接，形成的具有靶向遞送功能的偶聯(lián)藥物。最常見(jiàn)的如有ADC藥物，最早被開發(fā)應(yīng)用為“生物導(dǎo)彈”，利用生物大分子（抗體）的特異性，定向把小分子毒素（非特異性）送到病灶（如癌細(xì)胞），實(shí)現(xiàn)特異性殺滅癌細(xì)胞，而不影響正常細(xì)胞。

ADC藥物的起源可以追溯到1980年，最初的設(shè)想是將單克隆抗體靶向治療與傳統(tǒng)化療相結(jié)合，使其在抗癌方面既具有靶向的高度選擇性，又具有化療的強(qiáng)大殺傷力。

目前，ADC藥物主要由抗體－Linker（連接子）－藥物三部分構(gòu)成。其中，Linker連接的藥物多為細(xì)胞毒素，毒素相當(dāng)于彈頭，用于殺傷腫瘤細(xì)胞；抗體相當(dāng)于制導(dǎo)裝置，將毒素精確導(dǎo)航到靶點(diǎn)；連接子將抗體與毒素相連接，在細(xì)胞內(nèi)釋放毒素。

根據(jù)Nature預(yù)測(cè)，2020年以前上市的10款A(yù)DC產(chǎn)品到2026年銷售總額將超過(guò)164億美元。國(guó)內(nèi)ADC市場(chǎng)在2020年啟動(dòng)，預(yù)計(jì)2024年及2030年分別達(dá)到74億及292億人民幣的規(guī)模，2024年至2030年復(fù)合年增長(zhǎng)率為25．8％。

偶聯(lián)靶向遞送的幾種藥物形態(tài)

除了ADC，近年來(lái)還出現(xiàn)了多肽偶聯(lián)藥物（PDC），它和抗體偶聯(lián)藥物（ADC）類似，將其抗體－Linker（連接子）－藥物三部分中的“抗體”替換成了“多肽”，同樣可以具備靶向遞送功能。

PDC通過(guò)一個(gè)可分解的Linker將特定的多肽序列與細(xì)胞毒素共價(jià)結(jié)合，以提高局部細(xì)胞毒素濃度的形式靶向患病組織，減輕非疾病組織中的毒性效應(yīng)，減輕不良反應(yīng)，達(dá)到增效減毒的目的。

PDC整合了多肽的優(yōu)勢(shì)，具有較小的分子量，可生物降解的同時(shí)不會(huì)引起免疫原性反應(yīng)。通過(guò)修飾肽鏈的氨基酸序列，可改變PDC共軛疏水性和電離性質(zhì)，解決水溶性差、代謝不及時(shí)等問(wèn)題，同時(shí)促進(jìn)細(xì)胞和組織通透性，攻克了小分子藥物由于理化性質(zhì)欠佳在臨床開發(fā)中磨損率高的難題。一些特定的多肽載體還能克服腫瘤耐藥性，以及實(shí)現(xiàn)跨血腦屏障的藥物遞送。此外，相比于ADC技術(shù)，多肽偶練藥物PDC具有多種產(chǎn)業(yè)性優(yōu)勢(shì)，例如更好的均一性，更低的生產(chǎn)成本和周期等。

不止ADC、PDC藥物可以作為“生物導(dǎo)彈”，臨床上還有抗體細(xì)胞偶聯(lián)藥物（ACC）、病毒樣藥物偶聯(lián)物（VDC）、抗體片段偶聯(lián)藥物（FDC）、抗體寡核苷酸偶聯(lián)物（AOC）、抗體免疫刺激偶聯(lián)物（ISAC）、抗體生物聚合物偶聯(lián)物（ABC）等偶聯(lián)藥物都可以實(shí)現(xiàn)遞送功能，但在這些領(lǐng)域產(chǎn)業(yè)研究比較少，所以本文不做過(guò)多解讀。

除了偶聯(lián)藥物，還有一些直接提供“連接體（Linker）”的遞送技術(shù)。例如通過(guò)設(shè)計(jì)組裝核苷酸形成特定藥物載體，使其與目標(biāo)分子（包括具有靶向功能的大分子）的底層核酸序列偶聯(lián)，成為具備特定靶向遞送功能的核酸藥物。

相較于ADC、PDC藥物，納米核酸載體能夠?qū)崿F(xiàn)多靶向適配體掛載，提升適配體介導(dǎo)藥物與靶細(xì)胞特異性結(jié)合；通過(guò)接頭設(shè)計(jì)確保靶向適配體不折疊，立體構(gòu)象完整，保證了適配體介導(dǎo)的特異性和親和力；且靶向適配體和藥物整體分子量比值合理，提高了適配體介導(dǎo)藥物與靶細(xì)胞特異性結(jié)合幾率。納米核酸載體可以以序列延展方式掛載核苷酸片段和大部分N環(huán)類化藥等。

國(guó)內(nèi)藥物遞送先行者：藥企們都使用哪些遞送技術(shù)？

了解了遞送技術(shù)的多種多樣，那么國(guó)內(nèi)有哪些企業(yè)正在這個(gè)賽道發(fā)力呢？

首先，從病毒載體方面來(lái)看，基本上國(guó)內(nèi)從事基因治療的藥企普遍采用都是病毒載體，包括有奧源和力、至善唯新、輝大基因、信念醫(yī)藥、安龍生物等近20家國(guó)內(nèi)藥企正在使用病毒載體進(jìn)行基因療法開發(fā)。

另一方面，國(guó)內(nèi)也有不少提供專業(yè)病毒包裝技術(shù)服務(wù)的CRO／CDMO，例如有源興基因、吉?jiǎng)P基因、和元基因、白澤生物、漢恒生物、賽業(yè)生物等10余家企業(yè)，都能輸出品類多樣的臨床用病毒載體。

值得介紹的是，本導(dǎo)基因自主研發(fā)的一種類病毒（VLP）遞送技術(shù)，遞送載體是一種介于病毒載體與非病毒載體之間的類病毒體，利用mRNA莖環(huán)結(jié)構(gòu)與噬菌體衣殼蛋白特異識(shí)別的原理，通過(guò)病毒工程技術(shù)，將病毒和mRNA兩者的優(yōu)點(diǎn)完美地結(jié)合起來(lái)，創(chuàng)造了新型遞送技術(shù)VLP－mRNA。類病毒載體一方面借助了病毒的外殼，使得其感染細(xì)胞的效率特別高，另一方面，則基于mRNA的自身瞬時(shí)性的特點(diǎn)，能讓基因編輯治療更加安全可控，降低脫靶效應(yīng)。據(jù)悉，本導(dǎo)基因的VLP已經(jīng)進(jìn)入了臨床IIT階段。

與病毒載體和基因治療的強(qiáng)關(guān)聯(lián)不同，脂質(zhì)體（LNP）作為遞送載體，與之關(guān)聯(lián)的不僅有前沿的mRNA疫苗，還有各類抗癌化療藥物，以及對(duì)藥物緩釋、藥物吸收有需求的臨床藥物都可以采用脂質(zhì)體（LNP）作為遞送載體。

例如，競(jìng)諾擇生物在基礎(chǔ)的脂質(zhì)體（LNP）技術(shù)之上，創(chuàng)新研發(fā)了一種“多藥脂質(zhì)體技術(shù)”，通過(guò)控制脂質(zhì)體的載藥量和釋放速度，在保證療效的前提下降低藥物副作用；再通過(guò)修飾脂質(zhì)體的表面，提高脂質(zhì)體的靶向性，控制藥物在體內(nèi)的分布和作用時(shí)間。該技術(shù)能夠讓聯(lián)合使用的藥物在體內(nèi)的分布和半衰期發(fā)生變化，藥物在體內(nèi)分布將趨向一致，以此改善藥物的代謝行為，增強(qiáng)聯(lián)合化療的協(xié)同作用，彌補(bǔ)現(xiàn)有方法的不足，提高治療效果。

不過(guò)圍繞脂質(zhì)體（LNP）最前沿的研究還是建立在核酸疫苗之上，因?yàn)橐呙缱⑸浔旧韺?duì)其靶向性要求不高，所以成為核酸疫苗注射首選的藥物載體。在國(guó)內(nèi)，深信生物、傳信生物圍繞RNA藥物（多為疫苗）展開的研究都是借助了脂質(zhì)體（LNP）作為遞送載體，脂質(zhì)體（LNP）成為傳染疾病mRNA疫苗最具潛力的遞送技術(shù)。

其中，深信生物采用的脂質(zhì)體（LNP）是一種可離子化陽(yáng)離子的脂質(zhì)納米粒，內(nèi)部可以很好負(fù)載核酸藥物，相對(duì)于AAV病毒載體，這種載體具備更大的遞送空間和更好的重復(fù)遞送性。

另外，值得一提的還有渤因生物，該公司圍繞核酸（DNA）藥物／基因治療展開創(chuàng)新藥研發(fā)，采用的卻不是病毒載體，而是一種非病毒可重復(fù)遞送的藥物載體。據(jù)了解，該非病毒載體正是基于脂質(zhì)體（LNP）基礎(chǔ)之上研發(fā)而來(lái)針對(duì)DNA遞送特異優(yōu)化的創(chuàng)新載體。

其次在外囊泡載體方面，目前國(guó)內(nèi)主要有恩澤康泰、博泌生物、宇玫博生物等企業(yè)正在做相關(guān)研究。其中，恩澤康泰主要是基于外囊泡中外泌體一類型作為大分子遞送載體，通過(guò)工程化改造的方式對(duì)外泌體進(jìn)行改性，大幅提高了外泌體攜帶特定有效成分，包括多肽、蛋白質(zhì)、核酸藥物的載量，并實(shí)現(xiàn)特定器官的選擇性遞送。

而博泌生物采用的是紅細(xì)胞外囊泡（RBCEV）載體遞送，公司先從O型血捐獻(xiàn)者的血液中分離紅細(xì)胞，在體外誘導(dǎo)使其分泌RBCEVs，然后經(jīng)過(guò)純化得到高純度的RBCEVs。RBCEV可以裝載多達(dá)30kb的DNA片段，以及mRNA、反義寡核苷酸、siRNA等其他核酸藥物。由于紅細(xì)胞自身沒(méi)有細(xì)胞核和線粒體，也保證了分泌后的RBCEVs中核酸量含量極少，形成天然的空白核酸運(yùn)載載體。

除了前文提及的載體制劑遞送，中國(guó)從事ADC藥物研發(fā)的企業(yè)超過(guò)20家，包括有榮昌生物、樂(lè)普生物、康諾亞、嘉和生物等；從事PDC藥物研發(fā)的另有安醫(yī)生命科技（N1 Life）、泰爾康醫(yī)藥、主流生物、同宜醫(yī)藥、盛諾基醫(yī)藥等不到10家，該領(lǐng)域在國(guó)內(nèi)還處于開發(fā)的洼地，研究公司并不多見(jiàn)。

例如，安醫(yī)所使用的Linker連接的多肽不僅能夠靶向腫瘤微環(huán)境，使藥物腫瘤形成富集，讓腫瘤組織內(nèi)部藥物富集，從而提高藥效濃度、藥物吸收效率，降低藥物毒副作用，同時(shí)還利用多肽載體克服腫瘤的多重耐藥性，甚至擴(kuò)大原始藥物的適應(yīng)癥；康源久遠(yuǎn)用linker鏈接PEG化的毒素，克服了傳統(tǒng)ADC耦聯(lián)技術(shù)的隨機(jī)性缺陷。

百藥智達(dá)的納米核酸藥物合成工藝

最后，值得介紹的還有一家專門從事遞送技術(shù)服務(wù)的藥企——百藥智達(dá)，該公司以核苷酸和修飾物為材料，仿生tRNA人工合成多條寡核苷酸RNA或DNA鏈，遵循堿基配對(duì)原理自主裝配成T型藥物載體系列；該載體動(dòng)態(tài)粒徑約10nm（掛載藥物和靶向后約15nm），呈穩(wěn)定超螺旋結(jié)構(gòu)立體構(gòu)象，具有優(yōu)良熱力學(xué)、酸堿、血液生理、酶學(xué)穩(wěn)定性；同時(shí)，百藥智達(dá)開發(fā)出系列序列延展、綴合、偶合方法，可以高效掛載各類靶頭及藥物效應(yīng)分子，靈活成藥。

后記：沒(méi)有最好的載體，只有最適合的遞送技術(shù)

遞送技術(shù)在醫(yī)療產(chǎn)業(yè)中是一個(gè)非常大的盤子，從我們前文的研究可以看到，每一種遞送技術(shù)幾乎都有與之對(duì)應(yīng)的契合的研發(fā)藥物。例如，核酸藥物最常見(jiàn)的是采用病毒載體，究其緣由是病毒載體的感染能力高、宿主范圍廣、同時(shí)表達(dá)多個(gè)基因等優(yōu)勢(shì)都很適用于核酸藥物的運(yùn)載。

當(dāng)然，圍繞病毒載體本身的短板，也成為前沿科學(xué)家們致力于克服的地方，病毒的不可重復(fù)遞送性、隨機(jī)整合風(fēng)險(xiǎn)等，也就誕生出了諸如類病毒（VLP）載體類型，以及像渤因生物一樣嘗試用非病毒載體克服AAV病毒短板進(jìn)行基因治療的企業(yè)。

提到非病毒載體，脂質(zhì)體（LNP）則成為產(chǎn)業(yè)的寵兒，基于被遞送藥物的屬性差異，藥企開始圍繞脂質(zhì)體進(jìn)行的各類升級(jí)，以高效適應(yīng)遞送目標(biāo)藥物，納米脂質(zhì)體、陽(yáng)離子納米乳、多藥脂質(zhì)體等，成為產(chǎn)業(yè)發(fā)展的一大方向。由于脂質(zhì)體（LNP）的非主動(dòng)靶向性，目前成為核酸疫苗的首選遞送技術(shù)，強(qiáng)大的可離子化磷脂化學(xué)結(jié)構(gòu)改造優(yōu)化能力，以及解速度快，產(chǎn)量高等優(yōu)勢(shì)，未來(lái)的應(yīng)用前景巨大。

相較病毒和脂質(zhì)體（LNP）而言，天然的外囊泡則可以被認(rèn)為最前沿的第三代遞送技術(shù)。不僅易于設(shè)計(jì)靶向性，還能天然運(yùn)載大分子，且低免疫原性，有望彌補(bǔ)現(xiàn)有遞送技術(shù)的不足，成為獨(dú)具優(yōu)勢(shì)的給藥系統(tǒng)。然而，目前國(guó)內(nèi)從事該領(lǐng)域的企業(yè)并不多，技術(shù)工藝也需要進(jìn)一步完善。不過(guò)據(jù)業(yè)內(nèi)人士透露，目前國(guó)內(nèi)諸多藥企已經(jīng)開始嘗試使用外囊泡遞送技術(shù)替代原有遞送方式，以提高藥物遞送效率等相關(guān)屬性。

最后是我們提及小分子藥物，可以偶聯(lián)單抗、多肽等形成靶向藥物，定向?qū)Ш降讲∽儯ǘ酁槟[瘤）部位。與此同時(shí)，連接小分子藥物和大分子單抗／多肽的linker也可以成為科學(xué)家們優(yōu)化的對(duì)象，以及如何提高這些偶聯(lián)藥物的均一性，也是前沿藥企需要解決的問(wèn)題。所以，也有藥企嘗試直接構(gòu)建核酸載體，將需要運(yùn)載的藥物直接“回歸”到核苷酸序列本身，與納米核酸載體相連形成穩(wěn)定的核酸復(fù)合物，解決藥物遞送均一性問(wèn)題。

綜上所述，醫(yī)藥界對(duì)遞送技術(shù)的探索是永無(wú)止境的，永遠(yuǎn)在研究更為高效、完美的遞送系統(tǒng)。遞送系統(tǒng)與醫(yī)藥是協(xié)同發(fā)展，遞送在醫(yī)藥領(lǐng)域無(wú)處不在，也將是醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展中一個(gè)永恒的話題。

特別鳴謝：

百藥智達(dá)合伙人 魏鴻

競(jìng)諾擇生物創(chuàng)始人 馮皓

恩澤康泰CEO 孔關(guān)義

深信生物創(chuàng)始人 李林鮮

渤因生物創(chuàng)始人 潘雨堃

Carmine Therapeutic聯(lián)合創(chuàng)始人 史家海

科凝生物創(chuàng)始人 余渝

本導(dǎo)基因創(chuàng)始人 蔡宇伽

安醫(yī)生命科技（N1 Life）創(chuàng)始人 臧曉羽

康源久遠(yuǎn)CEO 劉樹民

和度生物．．．．．．

作者：王嬋